BD_FACSCanto流式細胞儀是對細胞進行自動分析和分選的裝置。它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細胞的一系列重要的生物物理、生物化學(xué)方面的特征參量,并可以根據(jù)預(yù)選的參量范圍把細胞亞群從中分選出來。
流式細胞儀雛形誕生于1934年,Moldavan提出使懸浮的單個血紅細胞流過玻璃毛細管,在亮視野下用顯微鏡進行計數(shù),并用光電記錄裝置測量的設(shè)想。1953年Crosland-Taylor根據(jù)牛頓流體在圓形管中流動規(guī)律設(shè)計了流動室。其后又經(jīng)過Coulter、Parker & Horst、Kamentsky、Gohde、Fulwyler、Herzenberg等人的不斷改進,設(shè)計了光電檢測設(shè)備和細胞分選裝置、完成了計算機與流式細胞儀的物理連接及多參數(shù)數(shù)據(jù)的記錄和分析、開創(chuàng)了細胞的免疫熒光染色及檢測技術(shù)、推廣流式細胞儀在臨床上的應(yīng)用。近20年來,隨著流式細胞儀及其檢測技術(shù)的日臻完善,人們越來越致力于樣品制備、細胞標記、軟件開發(fā)等方面的工作,以擴大FCM的應(yīng)用領(lǐng)域和使用效果。
流式細胞儀通常以激光作為發(fā)光源。經(jīng)過聚焦整形后的光束,垂直照射在樣品流上,被熒光染色的細胞在激光束的照射下,產(chǎn)生散射光和激發(fā)熒光。這兩種信號同時被前向光電二極管和90°方向的光電倍增管接收。光散射信號在前向小角度進行檢測,這種信號基本上反映了細胞體積的大??;熒光信號的接受方向與激光束垂直,經(jīng)過一系列雙色性反射鏡和帶通濾光片的分離,形成多個不同波長的熒光信號。